携带红色荧光蛋白的RU486可诱导真核表达载体的构建及其表达

作者：陈坚; 薛绪潮; 方国恩; 苏长青; 钱其军

来源：生物工程学报, 2008, (08): 1458-1463.

• RU486
• 诱导表达
• 基因调控
• 红色荧光蛋白 RU486
• inducible expression
• gene regulation
• DsRed

在基因治疗中,实现目的基因的调控表达是非常重要的。然而,传统基因载体的无调控地持续或不适当的表达会影响治疗效果,甚至可能带来致命的副作用。在本研究中,我们构建了一种带有DsRed红色荧光蛋白报告基因并可经RU486诱导的真核表达载体,并在体外评估了其调控表达作用。利用分子生物学技术,将DsRed基因和启动子,以及RU486系统构建成单一的质粒载体PDC-RURED,为减少RU486调控元件和基因表达元件之间的相互干扰,在两者之间加入1.6kb的绝缘子。经PCR检测和限制性酶切分析及序列测定均证实了载体的正确性。在转染HEK293细胞后,运用荧光显微镜和流式细胞技术证实了该载体的调控能力。没有R...

• 出版日期2008
• 单位中国人民解放军第八一医院; 中国人民解放军第二军医大学