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摘要
目的克隆淡色库蚊(Culex pipiens pallens)ATP合酶g亚基基因编码区序列并进行生物信息学分析,比较其在溴氰菊酯抗性品系和敏感品系中的表达方法利用PCR方法扩增ATP合酶g亚基基因编码区序列。利用生物信息学分析工具,预测ATP合酶g亚基基因编码蛋白的理化性质、蛋白结构域、跨膜区、信号肽和亚细胞定位;对淡色库蚊和其他物种的ATP合酶g亚基进行氨基酸序列多重比对,并构建系统发育树。通过实时定量PCR检测比较ATP合酶g亚基基因在淡色库蚊溴氰菊酯敏感品系和抗性品系中的表达。结果克隆出长306bp的淡色库蚊ATP合酶g亚基基因编码区序列(GenBank登录号:KY783435),该基因编码101个氨基酸。生物信息学分析ATP合酶g亚基基因编码蛋白理论分子质量单位(Mr)为11×103,等电点为9.56,在第6-98位氨基酸具有ATP合酶g亚基结构域,未发现信号肽和跨膜区,亚细胞定位预测以线粒体表达量最多(占39.1%)。实时定量PCR检测ATP合酶g亚基基因在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中的表达量是敏感品系中表达量的3.14倍。结论获得淡色库蚊ATP合酶g亚基基因编码区序列,并进行了生物信息学分析,证实该基因在溴氰菊酯抗性品系中高表达。
