复方苦参注射液影响HL-60细胞迁移的机制研究

作者：盛贤福; 王珺; 庄海峰; 张宇; 陈均法^*

来源：浙江中西医结合杂志, 2019, 29(01): 6-9.

• 复方苦参注射液
• 粒细胞集落刺激因子
• 微小RNA-146a
• 趋化因子CXC受体4
• 细胞迁移

目的探讨复方苦参注射液(CKI)影响HL-60细胞迁移的机制。方法选取HL-60细胞株作为研究对象,根据不同加药方案分为粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组(40ng/mL)、CKI组(0.5ng/mL)、G-CSF和CKI联合加药组和空白对照组,共培养48h后采用蛋白质印迹法(WB)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测微小RNA-146a(miR-146a)、趋化因子CXC受体4(CXCR4)等信使RNA(mRNA)、CXCR4蛋白表达变化情况;同时采用Transwell小室检测CKI、G-CSF作用前后细胞迁移率变化情况。结果 (1)与空白对照组相比,基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)能促进HL-60细胞的迁移[(2.01±0.13)比(1.05±0.10),P<0.05],而CKI组、G-CSF组、CKI联合GCSF组均能阻断HL-60细胞向SDF-1α迁移[(1.50±0.04)、(1.68±0.08)、(1.27±0.02)比(2.01±0.13),P<0.05]。(2)与空白对照组相比,CKI、G-CSF处理HL60细胞后,CXCR4的mRNA、蛋白表达均受抑[(0.75±0.10)、(0.47±0.09)比(1.00±0.08),P<0.05];与CKI组、G-CSF组相比,CIK联合GCSF组CXCR4的mRNA蛋白表达受抑更明显[(0.24±0.04)比(0.47±0.09)、(0.75±0.10),P<0.05]。(3)与空白对照组比较,G-CSF、CKI处理HL-60细胞后,miR-146a表达显著上调[(5.59±0.46)、(3.53±0.39)比(1.03±0.11),P<0.01];而联合加药组上调更明显[(6.76±0.54)比(5.59±0.46)、(3.53±0.39),P<0.05]。结论 CKI能协同G-CSF上调miR-146a表达,通过降低HL-60细胞表面的CXCR4表达而阻断CXCR4/SDF-1α信号轴,最终导致HL-60细胞体外迁移能力明显下降。

• 出版日期2019
• 单位浙江中医药大学