AIF重组质粒的构建、表达和功能的研究

作者：袁长青; 丁振华; 马树东; 凌朝辉; 刘胜军; 胡贵方; 郑莉; 周美娟; 欧程山

来源：毒理学杂志, 2005, (03): 202-204.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2005.03.012

• 凋亡诱导因子
• 真核表达载体
• 构建 Apoptosis-inducing factor
• Eukaryotic expression vector
• Construction

目的构建人凋亡诱导因子(AIF)基因功能片段的真核表达载体pcDNA3.1(+)AIF,并初步研究AIF在细胞凋亡中的作用。方法从人细胞中提取总RNA,RTPCR扩增AIF基因片段;克隆到pMD18T载体上,通过酶切和测序进行鉴定;将AIF基因片段插入pcDNA3.1(+),构建真核表达载体;电转化淋巴母细胞Raji细胞,观察AIF的表达水平和功能。结果成熟AIF蛋白分子在真核细胞中表达,并转移到细胞核中,诱导Caspase非依赖性细胞凋亡。结论成功构建了pcDNA3.1(+)AIF真核表达载体,AIF在Caspase非依赖性细胞凋亡中发挥重要作用。

• 出版日期2005
• 单位南方医科大学; 上海转基因研究中心