科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 通过敲低N6-甲基腺嘌呤（m6A）甲基转移酶Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白（WTAP）在皮肤鳞癌（cSCC）细胞中的表达，探讨WTAP对cSCC细胞增殖，迁移和侵袭能力的影响。方法 选取人cSCC细胞A431、SCL-1及正常人表皮角质形成细胞HaCaT,Western blotting法及qRT-PCR法分别检测各细胞中WTAP蛋白及mRNA表达。选取WTAP蛋白及mRNA表达最高的A431细胞转染WTAP敲低慢病毒shWTAP-1、shWTAP-2、shWTAP-3及阴性对照慢病毒shNC，使用qRT-PCR与Western blotting验证转染效率。选取敲低差异最显著的shWTAP-3转染细胞作为WTAP敲低组，shNC转染细胞作为对照组。采用比色法检测细胞m6A表达，CCK-8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 WTAP敲低组m6A表达低于对照组，各时点细胞OD值均低于对照组，克隆形成数少于对照组，穿膜细胞数、细胞迁移率低于对照组（P均<0.05）。结论 敲低WTAP可抑制cSCC细胞的增殖、侵袭和迁移，该作用可能通过下调m6A表达来实现。
