Smac类似物BV6泛素化对肺癌细胞A549迁移的影响

作者：王希方; 秦思达; 刘屹; 雷雨; 侯银银; 曹菲; 刘莹; 孙超; 王海鹏^*

来源：中国临床研究, 2019, 32(11): 1462-1465.

DOI：10.13429/j.cnki.cjcr.2019.11.002

• 肺癌
• Smac类似物BV6
• 泛素化
• 迁移
• A549
• NF-κB/p65

目的探讨Smac类似物BV6泛素化对肺癌细胞A549迁移的影响及BV6泛素化诱导肺癌细胞A549迁移的机制。方法采用空载质粒(空白对照组)、BV6-flag质粒(BV6-flag组)、BV6-flag质粒分别与泛素HA-ub质粒(BV6-ub组)、泛素HA-K48质粒(BV6-K48组)和泛素HA-K63质粒(BV6-K63组)转染肺癌A549细胞。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测BV6 mRNA转录情况;免疫共沉淀和免疫印迹法(Western blot)检测BV6泛素化情况;Transwell小室法检测细胞迁移情况;Western blot和qRT-PCR检测NF-κB/p65蛋白和mRNA表达情况。结果转染后,BV6-flag组、BV6-ub组、BV6-K48组、BV6-K63组A549细胞中BV6 mRNA表达显著高于空白对照组(P<0.05);而各转染组间BV6 mRNA表达无统计学差异(P>0.05)。各转染组A549细胞中BV6都发生泛素化,且BV6-K63组泛素化水平最高。与空白对照组比较,BV6-flag、BV6-ub、BV6-K63组A549细胞迁移数显著增高(P<0.05);与BV6-flag组比较,BV6-ub组、BV6-K63组A549细胞迁移数显著增高(P<0.05)。与空白对照组比较,BV6-flag组、BV6-ub组、BV6-K48组、BV6-K63组A549细胞中NF-κB/p65蛋白和mRNA表达上调(P<0.05);与BV6-flag组比较,BV6-ub组、BV6-K63组A549细胞中NF-κB/p65蛋白和mRNA表达显著上调(P<0.05)。结论 Smac类似物BV6可能主要通过K63位点发生泛素化促进A549细胞中NF-κB/p65表达,诱导迁移的发生。

• 出版日期2019
• 单位陕西省人民医院; 西安交通大学