摘要

根据牛Y 染色体特异重复序列、睾丸特异蛋白基因以及性别决定基因序列设计合成5对公牛Y 染色体特异引物, 依据牛骨胳肌α肌动蛋白前体基因和微卫星 DNA 序列设计合成 4 对牛 DNA特异引物(内标引物)。单重PCR扩增牛基因组DNA,筛选出4对牛Y 染色体特异引物和1对牛DNA特异内标引物。将不同的 Y 染色体特异引物与内标引物组合,多重PCR扩增牛基因组DNA、已知性别的牛成纤维细胞和克隆胚胎,筛选出 2 个可用于牛早期胚胎性别鉴别的PCR引物组合: B34/A12 和B78/A12。