ERK和Akt在地塞米松体外诱导胚胎期大鼠生长激素细胞分化中的作用

作者:张宇; 吕文明; 杨光; 陶宇; 郑宏山; 项莹; 李国忠; 程玉
来源:中国临床神经外科杂志, 2014, 19(08): 480-483.
DOI:10.13798/j.issn.1009-153X.2014.08.012

摘要

目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)与蛋白激酶B(Akt)在地塞米松(Dex)诱导大鼠胚胎垂体生长激素(GH)细胞分化中的作用。方法原代培养大鼠胚胎垂体细胞48 h,加入Dex(50 nmol/L)进行诱导分化48 h,或加入Dex培养44 h后加入ERK抑制剂(10μmol/L)、Akt抑制剂(25μmol/L)或同时加入ERK抑制剂和Akt抑制剂进行培养4 h。利用免疫荧光染色计数GH阳性细胞百分比、免疫印迹法分析ERK和Akt磷酸化水平、放射免疫分析法检测细胞培养液GH含量和噻唑蓝比色法检测细胞增殖。结果 Dex显著增加GH阳性细胞百分比及细胞培养液GH含量(P<0.05),但其对垂体细胞增殖活性无显著影响(P>0.05)。在Dex诱导GH细胞分化过程中,抑制ERK或抑制Akt均能够显著降低GH阳性细胞百分比(P<0.05)和细胞培养液GH含量(P<0.05);与抑制ERK或抑制Akt相比,两者联合应用能进一步显著降低GH阳性细胞百分比及细胞培养液GH含量(P<0.05)。Akt抑制剂显著降低Akt的磷酸化水平(P<0.05),ERK抑制剂显著降低ERK的磷酸化水平(P<0.05)。结论 Dex可诱导大鼠胚胎垂体细胞向GH细胞分化,但不影响细胞增殖活性;ERK及Akt在Dex诱导GH细胞分化的过程中均发挥一定作用。

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