摘要
为了建立高效、稳定的秦艽原生质体培养及再生体系,以秦艽无菌苗幼叶为外植体,进行秦艽优良性状的愈伤组织诱导和筛选,研究原生质体分离和再生的条件,进行原生质体培养和分化试验。结果显示,秦艽幼叶来源的黄色颗粒状愈伤组织在MS+1.5 mg/L 2,4-二苯氧基乙酸(2,4-D)+0.5 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+500 mg/L水解酪蛋白(CH)的固体培养基中继代12 d时,将其放入含有2%纤维素酶+1%半纤维素酶+0.5%果胶酶+0.05 mol/L CaCl2+0.4 mol/L甘露醇+0.1%2-吗啉乙磺酸(MES)的酶液组合中游离原生质体,产量(鲜质量)最高,可达4.5×106个/g,原生质体活力高达80%;植板密度为4.0×105个/m L时,在附加1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mol/L甘露醇+2%蔗糖+500 mg/L CH的DPD液体培养基中,原生质体持续分裂的效果最好。原生质体来源的愈伤组织在含有0.2 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA+3%蔗糖的MS固体培养基中形成胚性愈伤组织,分化频率可达96.55%。将生根苗移栽至排水良好的土壤中,成活率为100%。由此可见,秦艽疏松的黄色愈伤组织适合用于游离原生质体,该原生质体能够持续分裂形成愈伤组织,并再分化形成完整植株。研究结果可为进一步开展秦艽大规模细胞培养及秦艽的品质改良工作奠定基础。
- 出版日期2018
- 单位河南科技大学