敲低Bmi-1对鼻咽癌细胞CNE2放射敏感性的影响

作者：王巧; 谭诗生; 邹彦^*

来源：临床肿瘤学杂志, 2022, 27(01): 8-13.

• 鼻咽癌
• Bmi-1
• 放射敏感性
• CNE2

目的探讨敲低Bmi-1的表达水平对鼻咽癌细胞CNE2放射敏感性的影响。方法通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测4种鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、HNE1和HONE1中Bmi-1的表达,筛选出高表达Bmi-1的细胞株。设计3条针对Bmi-1 mRNA的干扰序列(shRNA1、shRNA2、shRNA3),用于构建慢病毒重组载体Bmi-1-shRNA1、Bmi-1-shRNA2、Bmi-1-shRNA3,然后转染至高表达Bmi-1的细胞株中,筛选出敲低Bmi-1效果最佳的慢病毒重组载体。将筛选出的慢病毒重组载体转染至高表达Bmi-1的鼻咽癌细胞株中,使用2 Gy放射线(IR)进行照射,通过平板克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布及凋亡情况。结果在4种鼻咽癌细胞株中,CNE2细胞的Bmi-1 mRNA表达水平最高(P<0.05),CNE1、CNE2细胞中Bmi-1蛋白表达相对较高(P<0.05)。构建的3条慢病毒重组载体Bmi-1-shRNA1、Bmi-1-shRNA2、Bmi-1-shRNA3均可降低CNE2细胞中Bmi-1的表达,且Bmi-1-shRNA3组最低(P<0.05)。在接受放射线照射后,与对照组(Bmi-1-NC+IR)相比,转染组(Bmi-1-shRNA3+IR)细胞增殖能力减弱[克隆细胞数目:(130.67±12.01)个vs.(61.00±8.19)个],细胞凋亡率增加[(13.40±0.66)%vs.(22.67±1.25)%], G2/M期细胞比例增加[(16.18±1.43)%vs.(22.34±2.00)%],差异有统计学意义(P均<0.05)。结论敲低Bmi-1表达可提高鼻咽癌CNE2细胞的放射敏感性。

• 出版日期2022
• 单位遵义医科大学; 贵州省人民医院