敲低Tribbles同源蛋白3抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖

作者：熊勇; 彭定凤; 胡勇钧; 唐哨勇; 冮洪生^*

来源：中国老年学杂志, 2019, 39(13): 3273-3277.

• 心肌成纤维细胞
• Tribble同源蛋白3
• 增殖
• 血管紧张素Ⅱ

目的研究敲低Tribbles同源蛋白(TRIB)3对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响。方法用AngⅡ处理心肌成纤维细胞,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹法检测细胞中TRIB3表达情况。心肌成纤维细胞转染TRIB3 siRNA慢病毒载体,经AngⅡ处理后,qRT-PCR和Western印迹检测干扰效率。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,羟脯氨酸法检测胶原合成,Western印迹法检测细胞中Ⅰ型胶原(COLL)Ⅰ、COLLⅡ和基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达,硝酸还原法检测培养液中一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养液中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)活性。结果 AngⅡ处理后的心肌成纤维细胞中的TRIB3表达水平升高(P<0.01)。TRIB3 siRNA慢病毒载体可明显下调AngⅡ条件下心肌成纤维细胞中TRIB3的表达水平(P<0.05)。AngⅡ处理后的心肌成纤维细胞增殖能力升高(P<0.05),细胞胶原合成增多(P<0.05),细胞中COLLⅠ、COLLⅡ蛋白水平升高(P<0.05),MMP-2水平降低(P<0.05),培养液中NO含量降低(P<0.05),iNOS活性降低(P<0.05)。下调TRIB3能够降低AngⅡ条件下心肌成纤维细胞增殖能力(P<0.05),减少细胞胶原合成(P<0.05),降低细胞中COLLⅠ、COLLⅡ蛋白表达(P<0.05),促进细胞中MMP-2蛋白表达(P<0.05),促进细胞分泌NO(P<0.05),提高细胞iNOS活性(P<0.05)。结论敲低TRIB3能够抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖,减少胶原合成,促进细胞分泌NO。

• 出版日期2019
• 单位华中科技大学同济医学院附属普爱医院