疫苗原辅料中猪圆环病毒1型、2型和猪细小病毒PCR检测方法的建立及验证

作者：施金荣; 程小玲; 申瑷琳; 张雪婷; 程尧; 何婧雯; 段凯^*

来源：微生物学免疫学进展, 2022, 50(05): 11-15.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2022.05.003

• 疫苗原辅料
• 猪圆环病毒1型
• 猪圆环病毒2型
• 细小病毒
• 聚合酶链式反应
• 外源病毒
• 方法验证
• 质量保证

目的 建立疫苗原辅料中猪圆环病毒1型(porcine circovirus type 1, PCV1)、2型(porcine circovirus type 2, PCV2)和猪细小病毒(porcine parvovirus, PPV)的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)检测方法并进行验证。方法 根据NCBI公布的PCV1、PCV2和PPV基因序列设计了3对特异性引物，通过优化反应条件，建立起检测疫苗原辅料中PCV1、PCV2和PPV的PCR检测方法，并对方法的重复性、中间精密度、专属性、耐用性和检测限进行了验证。结果 PCR反应的退火温度为55℃,特异性引物浓度为10μmol/L。该方法重复性、中间精密度、专属性和耐用性均良好，对PCV1、PCV2、PPV的最低检测限分别为1 pg/μL、100 fg/μL和10 fg/μL。结论 PCR检测方法可以有效检测出疫苗原辅料中外源病毒污染情况，能为生产合格的疫苗提供质量保证。

• 出版日期2022
• 单位武汉生物制品研究所有限责任公司