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摘要
为了制备禽腺病毒血清4型(FAdV-4)纤突蛋白1(Fiber 1)的多克隆抗体并对其特异性进行鉴定,将FAdV-4感染的病死鸡组织中扩增得到的Fiber 1基因构建到原核表达质粒pCold I,获得pCold I-Fiber 1表达质粒;然后将其转入大肠杆菌Rosetta(DE3)表达菌株中,加入1 mmol/L IPTG分别于16和37℃条件下诱导表达,SDS-PAGE检测结果显示重组蛋白Fiber 1以包涵体的形式成功表达,分子质量约53 kDa。表达蛋白纯化后免疫新西兰白兔,制备得到兔源Fiber 1蛋白的多克隆抗体。Western blot检验结果表明制备的Fiber 1阳性血清1∶1 000倍稀释时具有良好的反应性,间接免疫荧光试验测得多抗血清在1∶3 000倍稀释时,仍具有较好的活性且特异性良好。本研究为后续FAdV-4检测方法的开发及其相关致病机制的研究奠定了物质基础。
- 出版日期2020
- 单位南京农业大学
