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摘要
目的 克隆、表达出PTK重组蛋白 ,以鉴定酪氨酸激酶 (PTK)的活性 ,筛选酪氨酸激酶的抑制剂。方法 从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl PTK使其连接到表达载体pGEX4T 2上 ,转化大肠杆菌DH5a ,筛选鉴定出正确的转化子。转化菌株经IPTG诱导后进行表达并进行SDS PAGE分析。结果 经酶切和诱导表达鉴定 ,重组质粒pGEX4T 2 PTK构建成功 ,并高效表达了 5 8KD的GST PTK融合蛋白。结论 PTK基因被成功地重组至融合蛋白表达载体中 ,并在大肠杆菌中获得高效表达。该研究为进一步纯化、鉴定PTK的活性 ,筛选PTK的抑制剂奠定了基础。
- 出版日期2002-6-17
- 单位哈尔滨医科大学
