高通量斑马鱼造血缺陷突变体的正向遗传学筛选研究

作者:戴朝霞; 霍中军; 颜广; 刘靖; 王鹍; 温宗华; 陈英华; 刘伟; 黄志斌; 马宁; 陈小辉; 罗伟豪; 赵颖; 樊淑; 黄红辉; 温子龙; 张文清
来源:浙江大学动物科学学院, 中国,浙江省,杭州市.

摘要

目的:化学遗传学方法筛选并初步鉴定获得不同造血缺陷表型的斑马鱼突变体。方法:乙基亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱导雄性斑马鱼突变(founder),将其与AB野生型雌性斑马鱼交配产生F1代,源自不同founder的F1杂交产生F2家族,F2代同家族内自交所产生的F3代胚胎分别以βe7为探针的整体原位杂交实验(WISH)标记胚胎期珠蛋白基因进行红系造血缺陷突变体筛选、以中性红(neutral red,NR)活体标注巨噬细胞和苏丹黑B(Sudan black B,SB)活体标注中性粒细胞进行髓系造血缺陷突变体筛选,并根据所筛选到的突变体的不同造血过程缺陷表型分原始造...