CHO细胞表达的Ⅱ型单纯疱疹病毒膜糖蛋白G

作者：金华明^*; 魏丙卓

来源：病毒学报, 2020, 36(02): 281-290.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003668

• Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)
• 糖蛋白G(gG)

Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type Ⅱ,HSV-Ⅱ)的膜糖蛋白G(HSV-Ⅱ gG)在生物合成过程中被切割为两个片段,然而,HSV-Ⅱ gG蛋白的切割位点迄今未被实验测定。HSV-Ⅱ gG上带有大量的糖基化,然而糖基修饰在蛋白链上的分布还没有详细的实验确定。在本研究中,中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)重组表达的HSV-Ⅱ gG的胞外区(HSV-Ⅱ gG ECD)的两个切割产物(一个39kD,一个64kD)被用串联液相色谱-质谱(LC/MS)进行肽图分析。LC/MS肽图分析显示,39kD的产物是HSV-Ⅱ gG ECD蛋白切割后的N端片段,LC/MS肽图分析可以确定HSV-Ⅱ gG ECD的肽链切割点在第335位氨基酸。亲和层析和蛋白免疫印迹实验显示64kD产物是HSV-Ⅱ gG ECD蛋白切割后的C端片段。对两个片段的糖基化分析显示,39kD和64kD蛋白产物带有相似程度的N-连接的糖基修饰(各片段带两个N-连接的糖基化),而O-连接的糖基化仅发生在64kD片段上,而且糖基化程度非常高(几乎相当于该段蛋白链本身的分子量)。本研究的结果支持HSV-Ⅱ gG胞外区的C端部分属于粘蛋白家族。HSV-Ⅱ gG胞外区的C端部分存在于病毒外膜上,这一粘蛋白属性与其参与病毒与宿主细胞的黏附的假设相符合。

• 出版日期2020