H1和H3亚型猪流感病毒血凝素单因子血清的制备

作者:翁少亭; 曹建科; 常艳凯; 张素梅
来源:河南农业大学学报, 2016, 50(05): 646-650.
DOI:10.16445/j.cnki.1000-2340.2016.05.012

摘要

为了优化H1和H3亚型猪流感病毒(Swine Influenza Viruse,SIV)血清学检测方法,更准确了解猪流感病毒在中国猪群中的流行与分布情况,本试验制备了欧洲禽源猪H1N1病毒和人源猪H3N2病毒的血凝素特异性单因子血清。将人工合成的2种HA基因与p CAGGS真核表达载体做连接,构建HA基因的真核表达重组质粒。经酶切鉴定及体外瞬时表达检测证实重组质粒结构正确,能正常表达目的蛋白。大量提取纯化重组质粒,以每只鸡200μg的剂量肌肉接种SPF鸡,三免后收获鸡血清。通过血凝抑制试验检测HA单因子血清效价。试验结果显示,HA单因子血清抗体水平达到4log26log2。交叉HI试验结果显示,2个亚型血清间无交叉反应现象,特异性强。

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