禽网状内皮组织增生病病毒gp90全长蛋白的原核表达、纯化及其免疫原性分析

作者：高立; 祁小乐; 高宏雷; 高玉龙; 秦立廷; 孙芬芬; 张云; 王笑梅

来源：微生物学报, 2009, (10): 1380-1384.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2009.10.017

• 禽网状内皮组织增生病病毒
• gp90蛋白
• 原核表达
• 纯化
• 多克隆抗体 Reticuloendotheliosis virus
• gp90 protein
• expression in E.coli
• purification
• polyclonal antibody

【目的】原核表达免疫原性良好的禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)gp90蛋白,并制备抗gp90蛋白高效价多克隆血清。【方法】利用PCR技术,以pMD18T-env为模板,扩增得到REV的gp90蛋白编码基因,将其克隆入表达载体pET-28a(+)中,将构建的原核表达质粒pET28-gp90,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后进行gp90蛋白表达并鉴定。用纯化的gp90蛋白免疫6-8周龄Balb/c小鼠,制备抗gp90的多克隆血清。用间接免疫荧光试验...

• 出版日期2009
• 单位兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所