壳多糖酶3样蛋白调控人脐带来源间充质干细胞向脂肪细胞分化的作用

作者：李曼; 刘伟江; 袁福临; 白海涛; 李雪; 王洋; 刘元林; 焦宏; 张毅

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2022, 1-10.

• 间充质干细胞
• 壳多糖酶3样蛋白
• 成脂诱导分化

目的 探讨壳多糖酶3样蛋白（CHI3L1）调控人脐带来源间充质干细胞（hUC-MSC）成脂分化的作用。方法 复苏hUC-MSC并培养，流式细胞术检测细胞表面标志物CD14,CD34,CD45,CD73,CD90和CD105，油红O染色和碱性磷酸酶（ALP）染色检测体外成脂肪细胞和成骨细胞的诱导分化能力，实时荧光定量PCR(qPCR)检测成脂和成骨关键转录因子mRNA表达。利用慢病毒载体构建稳定敲低CHI3L1的hUC-MSC(sh-CHI3L1-MSC)和对照hUC-MSC(sh-NC-MSC)。体外诱导分化实验观察CHI3L1对hUCMSC成脂分化作用的影响，油红O染色检测sh-CHI3L1-MSC和sh-NC-MSC组细胞内脂滴数目，qPCR检测成脂分化关键转录因子mRNA表达。结果 培养的hUC-MSC高表达CD73,CD90和CD105，低表达或不表达CD14,CD34和CD45，并且CHI3L1基因敲低后不影响hUC-MSC表面标志物的表达。成骨诱导分化后，与自分化组相比，诱导组ALP活性增加，成骨分化标志物ALP和骨桥蛋白（OPN）mRNA表达亦显著增加（P<0.01）；成脂肪诱导分化后，经油红O染色，诱导组出现大量红色脂滴，qPCR结果显示诱导组脂肪酶（ADI）和过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR-γ）mRNA表达显著增加（P<0.01），表明明敲低CHI3L1基因的hUC-MSC仍具有成骨和成脂分化能力。同时，与sh-NC-MSC组相比，sh-CHI3L1-MSC成脂诱导组脂滴数明显增多，ADI和PPAR-γmRNA表达均显著增高（P<0.01），提示敲低CHI3L1基因的hUC-MSC成脂分化能力增强。结论 CHI3L1参与hUC-MSC的体外成脂分化调控。

• 出版日期2022-4-28
• 单位河北北方学院; 基础医学院