Nrf2对C2C12细胞肌浆网钙调节的影响及机制

作者：刘雨佳; 毛雅芸; 张缨

来源：北京体育大学学报, 2018, 41(03): 60-67.

DOI：10.19582/j.cnki.11-3785/g8.2018.03.009

• Nrf2
• C2C12细胞
• 2+]i" name="keyword">[Ca2+]i
• 肌浆网
• 钙调控

目的:Nrf2是调节机体内氧化应激的重要的核转录因子,本研究探讨Nrf2在小鼠成肌细胞系C2C12细胞中[Ca2+]i调节中的作用及其机制。方法:体外培养C2C12细胞,分别采用Nrf2的激动剂tBHQ和抑制剂Brusatol干预,将细胞分为空白对照组(Control,C组)、激动剂组(Stimulants,S组)和抑制剂组(Inhibitors,I组)。荧光比色法检测C2C12细胞ROS水平;采用Fluo-4 AM钙离子染料负载,激光扫描共聚焦显微镜检测C2C12细胞[Ca2+]i变化;Western blot方法检测C2C12细胞肌浆网钙调节蛋白RyR、FK-BP12、CaM、PKA、Ca MKⅡ、SERCA1和SERCA2的蛋白表达。结果:1)与C组相比,I组C2C12细胞ROS水平显著增加(P<0.01);2)在H2O2氧化应激刺激下,与C组相比,I组C2C12细胞[Ca2+]i在185.4 s后非常显著增加(P<0.01),而S组[Ca2+]i在61.8 s后显著降低(P<0.01);3)与C组相比,I组Nrf2蛋白表达显著降低(P<0.05),S组无显著性差异;4)与C组相比,肌浆网钙调节蛋白RyR、FKBP12、PKA显著增加(P<0.05),SERCA1和SERCA2蛋白显著降低(P<0.05),而S组蛋白表达无显著变化。结论:1)Nrf2在H2O2介导的C2C12细胞i[Ca2+]异常增加过程中起保护作用;2)Nrf2被抑制后可引起C2C12细胞RyR、PKA蛋白表达增加,从而增强肌浆网钙释放功能;同时引起C2C12细胞SERCA蛋白表达减少,使肌浆网钙回收功能减弱。

• 出版日期2018
• 单位北京体育大学; 江苏师范大学