桥尾蛋白磷酸化参与大鼠螺旋神经节神经元GABAA受体内化

作者：林晓宇; 韦芳玉; 覃江圆; 叶莞丽; 易健启; 陈慧英; 刘金兰; 覃继新; 苏纪平^*

来源：听力学及言语疾病杂志, 2022, 30(02): 192-196.

• 桥尾蛋白
• 磷酸化
• GABAA受体
• 内化
• 螺旋神经节神经元

目的 探讨桥尾蛋白(gephyrin)丝氨酸S270位点磷酸化在水杨酸钠(sodium salicylate, SS)介导的GABAA受体(GABA type A receptors, GABAARs)内化的作用。方法 将12只SD大鼠分成4组，分别为SS处理组、LiCl处理组、SS+LiCl处理组和对照组，每组3只，急性分离各组耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons, SGNs),SGNs原代培养48 h后分别用5 mM SS、1 mM LiCl、5 mM SS联合1 mM LiCl处理1 h,对照组不予处理；采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测GABAARsα2亚基、桥尾蛋白基因表达的改变；采用Western blot技术检测各组GABAARsα2膜蛋白和总蛋白表达的改变、桥尾蛋白及其S270位点磷酸化的改变。结果 RT-qPCR结果显示，各组GABAARsα2亚基mRNA、桥尾蛋白mRNA与对照组比较均无明显变化(P>0.05),Western blot结果显示，SS处理组GABAARsα2亚基膜蛋白(0.08±0.02)较对照组(0.18±0.04)表达显著下调(P<0.01),LiCl处理组(0.14±0.03)有效逆转SS诱导的GABAARsα2亚基膜蛋白下调(SS组为0.08±0.02)(P<0.05),LiCL组膜蛋白、各组总蛋白与对照组比较无明显变化(P>0.05);SS处理组桥尾蛋白S270磷酸化(0.84±0.02)较对照组(0.35±0.14)显著增强(P<0.001)。LiCl处理组(0.66±0.10)有效逆转SS诱导的桥尾蛋白S270磷酸化增强(SS组为0.84±0.02,P<0.05),LiCl处理组桥尾蛋白磷酸化、各处理组桥尾蛋白与对照组比较无明显变化。结论 桥尾蛋白S270位点磷酸化可增强参与SS诱导的SGNs GABAARs内化。

• 出版日期2022
• 单位右江民族医学院附属医院; 广西医科大学第一附属医院