花鲈Wap65-2基因的克隆、理化性质及其表达与哈维氏弧菌感染的相关性

作者：史雨红; 陈炯; 高姗姗; 沈广强; 陆新江; 李明云

来源：动物学研究, 2012, (05): 481-486.

• Wap65-2基因
• 花鲈
• 哈维氏弧菌
• 实时荧光定量PCR
• Western blot Wap65-2
• Lateolabrax japonicus
• Vibrio Harveyi
• qRT-PCR
• Western blot

Wap65-2(warm temperature acclimation related 65 kDa protein-2)是鱼类中发现的一种血浆糖蛋白,与细菌感染性免疫应激紧密相关。该研究首次克隆了花鲈Wap65-2基因全长cDNA序列。它由1601个核苷酸组成,包含一个大的开放阅读框,预期编码一个由436个氨基酸组成、相对分子质量为4.87×104的前体蛋白,N端19个残基为信号肽序列。序列和系统进化树分析表明,花鲈Wap65-2与欧洲海鲈进化关系最近,两者氨基酸同源性高达80.7%。健康花鲈Wap65-2基因mRNA主要在肝中表达,心和肌肉中少量表达。qRT-PCR分析揭示,哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染感染12h后,花鲈肝中Wap65-2基因mRNA表达显著上调,24h时达到峰值,为健康对照的6.89倍。原核表达花鲈Wap65-2并制备抗血清。Western blot分析表明,哈维氏弧菌感染12h后,花鲈血清中Wap65-2含量显著增加,36h时达到最大值,为健康对照的5.33倍。综上所述,花鲈Wap65-2基因的表达与其细菌感染性免疫应激紧密相关。

• 出版日期2012
• 单位宁波大学