B型产气荚膜梭菌C58-1株ε毒素基因序列分析与可溶性表达

作者：林初文; 张松林; 刘磊; 马永彪; 沈志强; 韩文瑜

来源：动物医学进展, 2015, (05): 29-32.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2015.05.010

• 产气荚膜梭菌B型C58-1株
• ε毒素基因
• 表达
• 序列分析 Clostridum perfringens type B C58-1strain
• εtoxin gene
• expression
• sequence analysis

利用PCR技术从B型产气荚膜梭菌扩增出ε毒素基因,然后用限制性核酸内切酶BamHⅠ和SalⅠ对其进行酶切,回收984bp的ε毒素基因片段,将其定向克隆在载体PET-32a中,获得重组质粒pETε984。将pETε984转化至受体菌BL21(DE3)中。重组菌株经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PACE分析。结果表明,重组目的蛋白在大肠埃希菌成功表达,融合蛋白大小为51ku,存在于细菌培养上清中,可溶性蛋白占菌体总蛋白相对含量的67.8%。序列分析表明C58-1株ε毒素蛋白序列与目前公布的所有B型和D型产气荚膜梭菌同源性均在99.7%以上,但ε毒素蛋白序列第321位出现了S→Y突变。研究结果...

• 出版日期2015
• 单位山东省滨州畜牧兽医研究院; 吉林大学