hsa-miR-203真核表达载体的构建及对K562细胞增殖与凋亡的影响

作者:何金花; 黎毓光; 谢杏仪; 陈顺仪; 王莉; 邹茂贤; 黄国贤
来源:临床检验杂志, 2012, (08): 595-598.
DOI:10.13602/j.cnki.jcls.2012.08.024

摘要

目的构建hsa-miR-203(人微小非编码RNA-203)的真核表达载体,观察其对人慢性粒细胞白血病细胞株(K562)增殖和凋亡的作用。方法构建hsa-miR-203靶向基因的真核表达载体PmiR-203,用脂质体转染法将PmiR-203转染K562细胞;可溶性噻唑盐-8(WST-8)法检测转染后的K562细胞增殖的情况,流式细胞术检测转染后K562细胞的早期凋亡率,实时荧光定量RT-PCR检测bcr/abl mRNA的表达水平,比色法测定caspase-3、caspase-9的活性。结果本法成功构建了重组真核表达载体PmiR-203,流式细胞术结果表明,K562细胞绿色荧光蛋白(GFP)的...

全文