摘要

目的评价巯螺旋体素(Borrelidin)对小鼠脾窦内皮细胞凋亡的诱导作用,为静脉畸形的研究和治疗探索新的药物。方法 180只10周龄雄性SPF小鼠(specific pathogen free muose,无特定病原体小鼠),质量25-30g随机分为3组:空白对照组、生理盐水组、Borrelidin组,每组60只。每组又随机分四个日程组(3、7、14、21d组),每组15只。小鼠脾脏直接注射生理盐水、Borrelidin后分别在3、7、14、21d四个时间点处死该组小鼠取其脾脏为标本:①石蜡切片光镜观察;②超薄切片电镜观察;③末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞;④免疫组化(SABC法)检测细胞凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达;⑤图像分析技术比较Borrelidin不同时段的凋亡率。结果空白对照组和盐水组未发现脾脏萎缩和脾窦组织结构破坏。Borrelidin3天组脾脏有不同程度肿胀,7天肿胀基本消失,14天有不同程度萎缩,21天有肉眼可见的明显萎缩;电镜显示Borrelidin组各时段均可见凋亡细胞,随药物作用时间延长凋亡细胞逐渐增多;TUNEL标记显示Borrelidin作用后3、7天组就有阳性表达,14天后凋亡广泛表达于脾窦内皮细胞;免疫组化显示Caspase-3的表达与凋亡的阳性表达趋势一致。显微图像及统计学分析Borrelidin组凋亡指数及Caspase-3的表达阳性率高,其统计学差异显著。结论 Borrelidin可通过Caspase-3途径诱导小鼠脾窦内皮细胞凋亡,可用于对静脉畸形治疗的进一步研究。