摘要

以国际标准牛型结核分枝杆菌(M.bovis)TMC410为材料,制备其总DNA,经过限制性内切酶Sau3A部分消化后,纯化回收9~25Kb片段,并将其用T4DNA连接酶与经BamHI酶切为粘性末端的LambdaEMBL3左右臂连接。用噬菌体包装蛋白包装,再进行连续稀释,然后将不同稀释度的噬菌体转移到宿主菌LE392。所获重组子为6×104,因为牛结核杆菌基因组大小约为4×106Kb则以99%概率筛到任一基因,要求的重组子数为1.08×103,故该基因文库已达到要求