氯化铯密度梯度离心法提纯枣疯病植原体DNA

作者：刘玲雪; 肖琦; 杨淑珂; 路兴波; 高瑞

来源：山东农业科学, 2017, 49(11): 134-137.

DOI：10.14083/j.issn.1001-4942.2017.11.027

• 枣疯病
• 植原体
• CTAB法
• 氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心

本研究利用CTAB法提取感染枣疯病的枣树叶片总DNA,再通过氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心从总DNA中富集纯化枣疯病植原体DNA。利用枣树26S r DNA基因和枣疯病植原体16S r DNA基因的特异引物,分别对富集纯化前后感病枣树叶片总DNA进行PCR扩增。结果表明,模板浓度为1 ng/μL时,富集后的总DNA模板扩增枣树26S r DNA的电泳条带亮度低于富集前,扩增枣疯病植原体16S r DNA电泳条带亮度明显高于富集前。Real-time PCR检测结果表明,模板浓度为1 ng/μL时,纯化后的枣疯病植原体DNA中26S r DNA相对纯化前的量为0.0638,而JWB相对纯化前的量为0.5035,这说明采用氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心法可以有效地从感染枣疯病枣树总DNA中富集纯化枣疯病植原体DNA。

• 出版日期2017
• 单位山东省农业科学院; 植物保护研究所