矮化蓖麻RAPD-PCR反应体系及扩增程序的优化

作者：姚远; 陈永胜; 李凤山; 黄凤兰; 宋永辉; 陈献辉

来源：中国生物制品学杂志, 2009, 22(03): 284-287.

DOI：10.13200/j.cjb.2009.03.81.yaoy.014

• 矮化蓖麻
• RAPD-PCR
• 反应体系
• 扩增程序
• 正交设计

目的优化矮化蓖麻RAPD-PCR反应体系及扩增程序。方法采用正交试验设计,优化RAPD-PCR反应体系(引物、dNTP、Taq酶和Mg2+浓度)及扩增程序(退火温度、退火时间、变性时间、延伸时间和循环次数)。结果25μl反应体系中最佳浓度配比为:引物0.36μmol/L,dNTP0.24mmol/L,Taq酶0.05U/μl,Mg2+1.20mmol/L;最佳扩增程序为:94℃预变性2min;94℃变性45s,36℃退火45s,72℃延伸80s,共35个循环;最后72℃再延伸5min。结论已优化了矮化蓖麻RAPD-PCR的反应体系及扩增程序,为应用RAPD-PCR技术对蓖麻株高性状进行研究奠定了基础。

• 出版日期2009
• 单位内蒙古民族大学; 生命科学学院