肺“俞募配穴”艾炷灸对哮喘小鼠Th17/Treg平衡的影响

作者:乔赟; 雷惠婷; 易蔚*; 赵彩娇; 夏星; 周蓓; 芮靖琳; 王增铎
来源:中国针灸, 2020, 40(11): 1217-1222.
DOI:10.13703/j.0255-2930.20191004-0001

摘要

目的:观察肺"俞募配穴"艾炷灸对哮喘小鼠辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)表达的影响,探讨艾炷灸治疗哮喘的可能作用机制。方法:将60只SPF级健康雄性Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、LY294002组(LY剂组)、电针组和艾炷灸组,各12只,采用卵清蛋白(OVA)致敏复制哮喘模型。除正常组外,其他组小鼠于实验第1、7、14天腹腔注射以0.9%氯化钠溶液配制的致敏液(含OVA15μg、氢氧化铝30 mg)0.5 mL/只,第15天起予1%OVA溶液雾化激发,每次20 min,每天1次,连续2周;正常组以0.9%氯化钠溶液代替进行以上操作。LY剂组于实验第13、14、15天予尾静脉注射LY294002;电针组于第15天起予电针"肺俞""中府"穴,疏密波,频率2 Hz/20 Hz,强度1 mA,每次15 min,每日1次,连续2周;艾炷灸组于第15天起予艾炷灸"肺俞"和"中府"穴,每次每穴灸3壮,每日1次,连续2周。每组小鼠于实验第16、18、22天记录引喘潜伏期,第29天统一取材,予ELISA法检测血清及肺泡灌洗液(BALF)中IL-17和IL-10表达,HE染色法观察肺组织病理形态改变,流式细胞术检测脾组织Th17、Treg百分比和Th17/Treg比值。结果:与正常组比较,模型组小鼠引喘潜伏期明显缩短(P<0.01),LY剂组、电针组和艾炷灸组小鼠引喘潜伏期较模型组延长(P<0.01)。干预后,模型组小鼠肺组织内见出血及大量炎性渗出,支气管及肺泡周围大量炎性细胞浸润,出现广泛的实变;LY剂组、电针组及艾炷灸组的肺组织病变程度明显减轻,支气管及肺泡结构基本正常,炎性渗出及炎性细胞浸润较模型组明显减少,艾炷灸组的炎性反应稍轻于LY剂组和电针组。与正常组比较,干预后模型组血清及BALF中IL-17含量,脾组织中Th17细胞百分比、Th17/Treg比值升高(P<0.01),血清及BALF中IL-10含量、脾组织中Treg细胞百分比下降(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,LY剂组、电针组和艾炷灸组血清及BALF中IL-17含量,脾组织中Th17细胞百分比、Th17/Treg比值下降(P<0.05,P<0.01),血清及BALF中IL-10含量、脾组织中Treg细胞百分比升高(P<0.05,P<0.01)。各干预组间以上指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:哮喘机体存在Th17/Treg失衡,肺"俞募配穴"艾炷灸疗法能通过调控Th17/Treg失衡,使机体免疫恢复稳态而达到控制哮喘的目的。