为了获得能维持胚胎干细胞(ES细胞)正常生长和增殖的饲养层细胞,试验对成纤维细胞培养方法、丝裂霉素C处理时间、处理后培养密度等因素进行研究。结果表明:妊娠12.5~13.5 d的胎鼠经原代培养后,丝裂霉素C处理4 h,每个培养皿接种1.5×106/mL细胞能获得最优的饲养层细胞。