牛分枝杆菌特异性PCR检测方法的建立及初步应用

作者:刘思国; 王春来; 宫强; 王牟平; 彭永刚; 张秀华; 郭洋; 郭设平; 邵美丽
来源:中国预防兽医学报, 2006, (01): 80-83.

摘要

根据已发表的牛分枝杆菌的pncA的基因序列,设计和合成了一对可扩增294 bp目的片段的引物,建立了特异性检测牛分枝杆菌的PCR方法。对牛分枝杆菌国际参考株和国内分离株成功扩增出294bp的特异性基因片段;对人结核分枝杆菌、副结核分枝杆菌、鸟胞内分枝杆菌和草分枝杆菌DNA的PCR扩增结果均为阴性。本PCR方法检测的敏感度可达到50 pg。对10份牛分枝杆菌培养阳性和10份阴性样品的DNA分别进行了PCR检测,结果10份阳性样品中有9份样品为PCR扩增阳性,阳性符合率为90%(9/10);而10份阴性样品则PCR扩增全部为阴性,阴性符合率为100%(10/10)。本方法可做为牛分枝杆菌的快速检测和流行病学调查的工具。