大鼠血清淀粉样物质P(SAP)基因的克隆及重组腺病毒制备

作者：娄小丽; 黄英; 舒畅; 陈洁; 罗庆; 王莉佳; 吴雪郡

来源：重庆医科大学学报, 2010, (04): 579-581.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.2010.04.006

• 血清淀粉样物质P
• 腺病毒
• 肺纤维化
• 分子克隆 SAP
• Adenovirus
• Lungfibrosis
• Clone

目的:制备能够表达大鼠血清淀粉样物质P(Serum amyloid P component,SAP)的重组腺病毒。方法:采用RT-PCR扩增的方法获取大鼠SAP,并将该基因采用定向克隆的方法克隆进入穿梭质粒pAdTrace-TO4中,进一步采用同源重组的方法将该质粒和腺病毒骨架质粒Adeasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组,然后用脂质体介导的方法导入包装细胞HEK293中,产生表达目的基因的重组腺病毒,扩增病毒后用倍比稀释法测定其滴度。结果:通过PCR技术从重组穿梭质粒和重组腺病毒质粒中扩增出700bp左右插入片段,测序结果和基因库中的基因序列一致。扩增后的重组腺病毒滴度为2.8×108...

• 出版日期2010
• 单位重庆医科大学