ESAT-6上调TLR-4通路增强人外周血γδT细胞产生淋巴因子的实验研究

作者：代光明; 汪洪; 郑权; 杜先智

来源：重庆医学, 2014, 43(13): 1537-1542.

• γδT细胞
• ESAT-6
• TLR-4
• 细胞免疫

目的观察结核分枝杆菌早期分泌靶抗原(ESAT-6)对γδT细胞产生淋巴因子的影响,并对其信号转导机制进行初步探讨。方法使用Ficoll密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞术分选纯化γδT细胞;Toll样受体-4(TLR-4)特异性抑制剂E5564处理γδT细胞以抑制TLR-4的功能,并用蛋白质免疫印迹法(Western blot)及逆转录-PCR(RT-PCR)法检测γδT细胞TLR-4蛋白及mRNA的表达,以不加任何刺激因子的γδT细胞作空白对照,用(ESAT-6)刺激γδT细胞,并在第0、1、3、6、9和12d取细胞上清液,用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素-γ(IFN-γ)的分泌水平。结果 Western blot及PCR结果显示ESAT-6能显著提高γδT细胞TLR-4基因的转录与蛋白的表达(P<0.01);ESAT-6能显著提高γδT细胞IL-17、TNF-α、IFN-γ的表达(P<0.01),而TLR-4特异性抑制剂E5564能显著的抑制ESAT-6所致的γδT细胞IL-17、TNF-α、IFN-γ淋巴因子的增加(P<0.01)。结论 ESAT-6能显著上调γδT细胞IL-17、TNF-α及IFN-γ的表达,其增强γδT细胞IL-17、TNF-α及IFN-γ表达的信号转导机制可能与TLR-4信号通路有关。

• 出版日期2014
• 单位重庆医科大学附属第二医院; 遂宁市第一人民医院