类人胶原蛋白基因COL6A2的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：王皓; 徐立群; 陈欢; 孙旸; 王刚; 陈光

来源：吉林农业大学学报, 2014, (01): 51-55+65.

DOI：10.13327/j.jjlau.2014.1588

• 胶原蛋白
• 重组载体
• 大肠杆菌
• 克隆
• 纯化 collagen
• recombinant vector
• Escherichia coli
• cloning
• purification

根据GenBank上查到的人胶原蛋白序列COL6A2(NM058175.2),利用Primer 5设计特异性引物,以吉林农业大学生物物理实验室构建的重组质粒pCMV-Sport6-COL6A2为模板进行目的基因的克隆,获得目的基因COL6A2,然后用双酶切的方法连接目的基因COL6A2和表达载体pET32a,将连接产物转化到大肠杆菌中构建原核表达载体pET32a-COL6A2。再将鉴定成功的重组质粒pET32a-COL6A2分别转化到大肠杆菌BL21、BL21(DE3)、BL21(BE3)plysS及Rosetta(DE3)中,采用1 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导...

• 出版日期2014
• 单位吉林农业大学