炭疽芽孢杆菌PCR鉴定方法的建立

作者：梁冰; 祝令伟; 纪雪; 周伟; 孙洋; 刘军; 郭学军; 冯书章

来源：中国兽医学报, 2016, 36(08): 1363-1370.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2016.08.18

• 炭疽芽孢杆菌
• PCR
• 血液
• 土壤

根据炭疽芽孢杆菌3种特异性毒力基因的序列,包括保护性抗原基因(pag)、荚膜基因(cap)和S-层蛋白基因(sap),建立多重PCR鉴定方法。该方法检测11株炭疽芽孢杆菌均为阳性,检测29株非炭疽的其他需氧芽孢杆菌属菌株均为阴性。该方法检测模拟血液样品的灵敏度是2×106 CFU/mL(每1mL血液样品最低含有2×106细菌),而样品增菌后的检测灵敏度是2×102 CFU/mL。制备加入炭疽疫苗菌株芽孢的模拟土壤样品,经增菌培养后,PCR检测灵敏度为3×104芽孢/g。另外,还设计了炭疽芽孢外壁结构蛋白基因BclA的鉴定引物,利用该引物的PCR扩增片段长度以及测序结果,能够有效区分Ⅱ号炭疽疫苗菌株和临床分离菌株,本研究能够为炭疽临床诊断和环境监测工作提供技术支持。

• 出版日期2016
• 单位吉林农业大学; 军事医学科学院军事兽医研究所; 动物科技学院