不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体的构建及重组蛋白的表达

作者：刘彤; 李洋; 朱戈; 李丰

来源：中国医科大学学报, 2011, (12): 1057-1059+1071.

• PAK6基因
• 激酶活型
• 激酶死型
• 原核表达
• 融合蛋白 PAK6 gene
• kinase active
• kinase dead
• prokaryotic expression
• fusion protein

目的构建不同激酶活性的hPAK6原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达。方法野生型、激酶活型和激酶死型pcDNA3.1-PAK6经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coli BL21中诱导不同型GST-hPAK6融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果。结果野生型、激酶活型和激酶死型hPAK6编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切及测序鉴定正确,并在E.coli BL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量均为101 kDa,免疫印迹检测到了融合蛋白表达。结论成功构建不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体,并分别诱导表达出GST-PA...

• 出版日期2011
• 单位中国医科大学