毛细管电泳法检测耐米托蒽醌乳腺癌细胞系全基因组甲基化水平

作者：邓婷婷; 谢妮; 黄艳华; 黄海燕; 李子刚; 胡章立; 袁建辉

来源：癌变.畸变.突变, 2014, 26(02): 108-112.

DOI：10.3969/j.issn.1004-616x.2014.02.006

• 毛细管电泳
• DNA甲基化
• MCF-7细胞
• 流式细胞术

目的:建立对米托蒽醌(Mit)耐药的乳腺癌MCF-7细胞系,并探讨乳腺癌细胞产生耐药与其基因组甲基化水平之间的关系。方法:用0.005、0.010和0.020μmol/L浓度的米托蒽醌染毒乳腺癌MCF-7细胞,建立对米托蒽醌不同耐药程度的MCF-7耐药细胞系,采用流式细胞术检测各染毒组MCF-7细胞内药物荧光强度D(755)值,确定Mit耐药细胞系的建立;提取各组细胞的DNA,利用毛细管电泳法检测野生型对照组及各染毒组细胞全基因组DNA甲基化水平。结果:野生型对照组、0.005、0.010和0.020μmol/L米托蒽醌染毒组的(755)值依次为16.1±0.04、14.3±0.12、13.3±0.07和9.7±0.08,与野生型对照组相比,随着药物染毒浓度的增加,MCF-7细胞内药物的D(755)值逐渐减少,其中0.020μmol/L染毒组较对照组显著减少,差异有统计学意义(P<0.05),表明细胞耐药性增强;而上述各组DNA甲基化水平依次为42.25%±0.64%、37.97%±1.18%、34.27%±0.14%、31.16%±0.80%,与野生型对照组相比,各染毒组细胞基因组DNA甲基化水平逐渐降低(P<0.05),且各染毒组间两两比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论:成功建立了对Mit耐药的MCF-7细胞系;确定了毛细管电泳法检测基因组DNA甲基化水平的电泳分离条件。

• 出版日期2014
• 单位深圳市疾病预防控制中心; 深圳大学; 深圳市第二人民医院; 生命科学学院; 北京大学深圳研究生院