柯萨奇病毒A组16型感染性滴度检测用国家参考品的制备及标定

作者：杜加亮; 刘悦越; 于晓方; 张文艳; 贾双双; 刘艳; 赵岩; 国泰

来源：国际生物制品学杂志, 2016, 39(06): 275-280.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2016.06.004

• 肠道病毒属
• 病毒感染性滴度
• 国家参考品

目的制备柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)感染性滴度检测用国家参考品,为CA16疫苗生产过程中的病毒滴度控制和CA16疫苗的免疫效果评价提供国家参考品。方法将验证合格的CA16(C1亚型)培养液分装(0.5 ml/支)制成候选参考品。3个独立实验室分别对候选参考品进行协作标定,用细胞培养法检测CA16感染性滴度,用Behrens-K(a|¨)rber法计算半数细胞感染量(50%cell culture infective does,CCID50)。同时,将CA16参考品分别置于-20、4、2225(室温)和37℃条件下或反复冻融,进行热稳定性、长期稳定性和冻存稳定性研究。结果制备的CA16参考品的病毒滴度为(6.80±0.95)lgCCID50/ml。CA16参考品于-60℃保存12个月、-20℃保存6个月和4℃保存28 d后的病毒滴度无显著下降,表明稳定性较好;在2225℃(室温)和37℃条件下,CA16参考品每天的病毒滴度损失率分别为3.4%和4.4%,而且分别保存27和21 d后病毒滴度无明显下降;对CA16参考品反复冻融的病毒滴度损失率为4.8%/次。结论成功制备了CA16感染性滴度检测用候选国家参考品,将CA16参考品赋值确定为(6.80±0.95)lgCCID50/ml。

• 出版日期2016
• 单位中国食品药品检定研究院; 吉林大学第一医院