基于NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡探讨痹通方对类风湿关节炎大鼠的保护作用及机制研究

作者：齐庆; 孙蓬远; 许诺; 关蕊; 郑建南; 赵夜雨; 于静; 高明利^*

来源：中华中医药学刊, 2023, 1-13.

• 类风湿关节炎
• 痹通方
• 细胞焦亡
• NLRP3炎症小体

目的：探讨痹通方通过调控NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡途径对类风湿关节炎大鼠的保护作用及机制。方法：将70只SD大鼠随机分为7组：正常组，模型组，痹通方低、中、高剂量组分别给予4.2、8.4、16.8g/kg·d灌胃，甲氨蝶呤组按7.5mg/kg·d灌胃，MCC950组30mg/kg.d灌胃，正常组和模型组给予蒸馏水灌胃。于造模后第29天开始灌胃给药，每天一次。在末次给药8h后取材，HE染色法检测各组大鼠踝关节组织形态学变化；ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、 白介素-18（IL-18）、白介素-1β（IL-1β）相关指标变化；RT-qPCR法检测TNF-α、IL-18、IL-1β、血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白-1a(MIP-1a)相关基因水平变化，免疫组化法检测IL-1β，NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）蛋白水平变化，WesternBlot法检测黑素瘤缺乏因子2（AIM2）、凋亡相关点样蛋白（ASC）、半胱氨酸蛋白酶前体-1（pro-caspase1）、caspase1、IL-18、IL-1β、活化的gasderminD（cleaved-GSDMD）、GSDMD、NLRP3。结果：与正常组比较，模型组大鼠踝关节间隙变窄，关节软骨表面不规则增厚，骨质出现轻度破坏，关节内可见炎性细胞和滑膜组织增生（P＜0.01），模型组血清TNF-α、IL-18、IL-1β含量均明显升高（P<0.01），模型组TNF-α、 IL-18、IL-1β、MCP-1、MIP-1a mRNA表达均明显升高（P<0.01），免疫组化法显示模型组IL-1β，NLRP3蛋白表达水平均明显升高（P<0.01），WB法显示模型组AIM2、ASC、pro-caspase1、caspase 1、IL-18、IL-1β蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）。与模型组比较，痹通方高剂量组、甲氨蝶呤组及MCC950组上述各项检测指标均得到明显改善（P＜0.05或0.01）。结论：痹通方能够改善大鼠类风湿关节炎状态，其机制可能与调控NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡途径相关。

• 出版日期2023
• 单位辽宁中医药大学; 辽宁中医药大学附属医院