牛奶过敏原β-乳球蛋白的单克隆抗体制备及其双抗体夹心法的建立

作者：陈献雄; 邬玉兰; 吉琼梅; 杨平常; 刘志刚

来源：食品安全质量检测学报, 2015, (11): 4545-4550.

• 牛奶β-lactoglobulin蛋白
• 单克隆抗体
• 特性鉴定
• 过敏原检测 β-lactoglobulin protein from milk
• monoclonal antibody
• characterization
• allergen test

目的制备与鉴定牛奶主要过敏原β-乳球蛋白(β-LG)的单克隆抗体,并建立双抗体夹心检测法。方法以β-LG为抗原免疫BALB/c小鼠,融合免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤NS-1。半固体培养基法结合有限稀释法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,采用蛋白A亲和层析法获得纯化抗体。利用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型。间接ELISA方法和Western Blot鉴定抗体效价和特异性以及与其他过敏原的交叉反应性。建立双单克隆抗体夹心法,检测β-LG。结果共获得抗β-LG细胞株6株,分别命名为1H8,4A7,4C3,1F9,1G5,3D11,效价均高于20万。经抗体亚型鉴定...

• 出版日期2015
• 单位深圳大学