GlcNAc经O-糖基化依赖性途径抑制大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞中MAPKs通路

作者：刘博深; 王轶; 郭林民; 孙中义^*

来源：第三军医大学学报, 2019, 41(03): 206-212.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201808180

• 海绵体平滑肌细胞
• GlcNAc
• O-糖基化
• MAPKs

目的探讨β-N-乙酰氨基葡萄糖(β-N-acetylglucosamine,GlcNAc)对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)通路的影响。方法分离健康成年大鼠阴茎组织,高糖培养基诱导阴茎海绵体平滑肌细胞(cavernous smooth muscle cells,CSMC)分离生长,免疫荧光、免疫组化鉴定CSMC,GlcNAc处理CSMC 12 h,分别于0、10 min、1、2、4、8、12 h收集细胞裂解液,O-(连接) N-乙酰葡糖胺转移酶(O-N-acetylglucosamine transferase,OGT)抑制剂Alloxan、O-(连接) N-乙酰葡糖胺水解酶(O-GlcNAcase,OGA)抑制剂Thiamet G及GlcNAc处理CSMC 72 h,Western blot检测蛋白总糖基化水平及MAPKs通路相关蛋白在12、72 h的磷酸化水平。结果成功分离培养大鼠CSMC,GlcNAc显著提升了CSMC细胞O-糖基化水平(P <0. 05)。处理细胞后12 h,GlcNAc显著抑制大鼠CSMC的ERK1/2、JNK1/2/3和p38的蛋白磷酸化水平(P <0. 05),处理细胞后72 h,GlcNAc显著抑制了大鼠CSMC的ERK1/2和p38蛋白磷酸化水平(P <0. 05),但不影响其总蛋白的表达水平(P>0. 05),且与Thiamet G的作用相同。另外,GlcNAc与Thiamet G能协同抑制ERK1/2、JNK1/2/3和p38的蛋白磷酸化水平(P <0. 05)。结论 GlcNAc经O-糖基化依赖性途径抑制阴茎海绵体平滑肌细胞中MAPKs通路。

• 出版日期2019
• 单位中国人民解放军陆军军医大学; 第三军医大学