小鼠抗HCMV-gB多克隆抗体的制备及初步应用

作者：韩慧平; 于三科

来源：动物医学进展, 2012, (02): 51-54.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2012.02.005

• CpG-ODN
• Al(OH)3
• 免疫佐剂
• 多克隆抗体 CpG-ODN
• Al(OH)3
• adjuvant
• polyclonal antibody

为了快速制备抗HCMV-gB小鼠多克隆抗体,通过PCR扩增HCMV-gB(57aa～146aa)编码序列并克隆到原核表达载体pET21b(+)多克隆位点,用重组质粒转化大肠埃希菌Rosetta(DE3)并通过IPTG诱导表达,经镍胶亲和层析纯化和透析复性获得重组蛋白。以CpG-ODN和Al(OH)3复合佐剂作为重组蛋白的免疫佐剂,通过0周和3周2次肌肉注射免疫Balb/c小鼠,并在第5周采血分离免疫血清。用ELISA检测免疫血清效价,并通过Western blot检测免疫血清对哺乳动物细胞表达的HCMV-gB1和gB2的反应性。结果显示,本研究制备的免疫血清ELISA滴度达到1∶51 200～...

• 出版日期2012
• 单位西北农林科技大学