蓝藻抗病毒蛋白-N衍生物的克隆、发酵与纯化

作者:杨辉; 吴崇超; 陈佳; 陈伟; 杨依丽; 罗勇; 姚冬生; 熊盛
来源:生物技术通报, 2012, (05): 116-120.
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.05.001

摘要

蓝藻抗病毒蛋白-N(Cyanovirin-N,CVN)能特异性与病毒表面糖蛋白结合,抑制病毒进入宿主细胞及抑制病毒感染细胞与未感染细胞的融合。通过分子设计及优化,在CVN的N-末端连接了5个氨基酸的柔性多肽(GGGGS),构建了SUMO-L5-CVN融合表达系统。SUMO-L5-CVN在大肠杆菌BL21中呈可溶性表达;通过表达条件优化,以0.5 mmol/L IPTG在20℃诱导24 h是最佳的诱导表达条件;SUMO-L5-CVN表达量占菌体总蛋白的30%;经Ni-NTA亲和层析获得融合蛋白SUMO-L5-CVN,SUMO蛋白酶酶切,以及进一步从Ni-NTA亲和层析获得的目的蛋白L5-CVN蛋...

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