摘要

目的:为深入研究Cbl-b/c-Cbl在巨噬细胞分化发育中的作用,拟建立LysM Cre Cbl-b/c-Cbl小鼠模型,并初步分析其免疫表型。方法:将LysMCre小鼠和Cbl-b-/-及c-Cblf/f小鼠杂交得到LysM Cre+Cbl-b-/-/cCblf/f小鼠,从而在巨噬细胞中同时敲除Cbl-b和c-Cbl。并通过PCR和Western-blot鉴定模型建立的成功,通过HE、Giemsa及天狼星红染色和流式细胞仪分析LysM Cre+Cbl-b-/-/c-Cblf/f小鼠免疫表型。结果:通过PCR和Western-blot鉴定LysM Cre+Cbl-b-/-/c-Cblf/f模型建立成功,表型分析提示Cbl-b和c-Cbl在髓样来源细胞敲除后,导致DC、粒细胞和巨噬细胞比例增多,尤其是肺泡巨噬细胞在肺泡中大量侵润,其绝对数是WT小鼠的几百倍,且最终LysM Cre+Cbl-b-/-/c-Cblf/f小鼠因肺纤维化而死亡。结论:Cbl-b和c-Cbl在巨噬细胞的分化发育中发挥极其重要的作用,其同时在巨噬细胞中缺失,可以导致肺巨噬细胞的急剧增多,引起炎症和肺纤维化而导致小鼠死亡。