大鼠STIM1基因真核表达载体构建及蛋白表达定位

作者：庞春秀; 林德馨

来源：生物技术, 2016, (02): 113-118.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.02.021

• STIM1
• 真核载体
• 蛋白表达
• A7r5细胞 STIM1
• eukaryotic vector
• protein expression
• A7r5 cell

[目的]构建大鼠STIM1基因重组质粒并在A7r5细胞中表达、定位。[方法]应用基因合成方法获得STIM1基因序列,克隆至携带EGFP标签的真核表达载体p EGFP-C_1、p IRES_2-EGFP,经菌落PCR、酶切、测序鉴定后,转染至A7r5细胞,Western Blot检测蛋白表达,激光共聚焦观察其定位。[结果]STIM1全长2 058 bp,重组载体经酶切、PCR、测序鉴定构建正确,在A7r5细胞内高表达,并主要定位于细胞质。[结论]构建大鼠STIM1基因重组质粒并在A7r5细胞质中表达,为建立稳定高表达细胞系及后续功能研究奠定基础。

• 出版日期2016
• 单位福建医科大学