AFⅠ基因植物表达载体的构建及抗冻百合的培育

作者：王忠凯; 颜笑洒; 李艳霞; 赵娟; 和四梅; 董扬; 时晓菲; 张业胜

来源：农业生物技术学报, 2018, 26(06): 1025-1033.

• 东方百合品种木门
• 植物表达载体
• 遗传转化
• AFⅠ

百合(Lilium brownii var.viridulum)是世界上主要的鲜切花之一,具有很高的观赏价值和经济价值。然而,低温会抑制百合的生长,严重时导致大面积减产。为提高百合抗冻能力,本研究对极地冻鱼(Anarhichas minor)的抗冻蛋白基因(antifreeze protein gene,AFPⅢ)进行植物密码子优化,合成抗冻基因(antifreeze gene,AFⅠ)序列。通过酶切连接的方法将AFⅠ基因插入Pcambia1390骨架载体,利用PCISV(Peanut chlorotic streak caulimovirus)启动子启动该基因的表达,构建了AFⅠ基因植物表达载体P1390-PCISV-AFⅠ。将载体P1390-PCISV-AFⅠ电击转化农杆菌(Agrobacterium)菌株EHA105,经菌落PCR检测发现载体P1390-PCISV-AFⅠ已经成功转化入农杆菌菌株中。通过农杆菌介导的遗传转化方法将AFⅠ基因转化到受体东方百合品种木门(Lily)中,经PCR鉴定,确定AFⅠ基因已整合到受体基因组中。抗冻实验以及半定量RT-PCR研究结果表明,转基因阳性植株相较于野生型植株在-2℃情况下具有良好的抗冻效果。本研究结果对于抗冻植物新品种的培育具有重要的参考价值。

• 出版日期2018
• 单位中国科学院昆明动物研究所