敲低Piezo2对人结肠癌细胞HCT116和SW620增殖、迁移和侵袭的影响

作者：张浩鹏; 张丽君; 纪琴; 侯少华; 常鑫; 李海^*

来源：宁夏医科大学学报, 2023, 45(03): 243-249.

DOI：10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2023.03.005

• 结直肠癌
• 机械应力
• Piezo2
• 侵袭
• 迁移

目的 探讨敲低机械敏感性离子通道Piezo2对人结肠癌细胞HCT116和SW620增殖、迁移侵袭能力的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测结直肠癌组织及其相应癌旁组织中Piezo2的mRNA和蛋白表达情况；Western blot检测Piezo2在正常结肠上皮细胞NCM460、结肠癌细胞SW480和HCT116、结肠癌淋巴结转移细胞SW620的表达；将HCT116、SW620细胞系稳定转染Piezo2敲低慢病毒载体，利用RT-qPCR和Western blot检测转染后HCT116和SW620细胞的Piezo2表达情况；CCK-8法检测转染后HCT116和SW620细胞的增殖能力；Transwell法和细胞划痕修复实验检测转染后HCT116和SW620细胞的侵袭和迁移能力；通过裸鼠皮下成瘤检测HCT116和SW620细胞敲低Piezo2后肿瘤大小变化，通过免疫组化检测ki67表达。结果 RT-qPCR及Western blot实验显示，癌组织Piezo2的mRNA和蛋白表达均高于癌旁组织（P均<0.05）;Western blot结果显示，Piezo2在SW620、SW480和HCT116细胞中的表达均高于正常肠上皮细胞（NCM460）(P均<0.05)；在HCT116与SW620细胞内成功敲低Piezo2表达；CCK-8检测结果显示，敲低Piezo2表达抑制了HCT116和SW620细胞的增殖能力；敲低Piezo2表达能抑制HCT116和SW620细胞的侵袭能力（P均<0.01）；敲低Piezo2表达可以抑制HCT116和SW620细胞迁移能力（P均<0.01）；皮下成瘤结果显示，Piezo2敲低组肿瘤体积和质量少于对照组（P均<0.01），免疫组化检测显示Piezo2敲低组肿瘤组织中的ki67表达弱于对照组（P<0.01）。结论 敲低人结肠癌细胞HCT116和SW620的机械敏感性离子通道Piezo2表达后，其增殖、侵袭、迁移能力降低。

• 出版日期2023
• 单位济宁医学院附属医院; 宁夏医科大学; 宁夏医科大学总医院