奶牛孕酮间接竞争ELISA检测方法的建立

作者：邵谱; 杨正涛; 张乃生; 周虚

来源：安徽农业科学, 2008, (18): 7653-7654+7776.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.18.143

• 奶牛孕酮
• 间接竞争ELISA
• 定量检测

[目的]为孕酮检测试剂盒的研制奠定基础。[方法]采用二环己基碳化二亚胺法制备检测抗原,建立了检测奶牛孕酮含量的间接竞争ELISA方法。[结果]检测奶牛孕酮的间接竞争ELISA的最佳反应条件确定为:最佳包被浓度为100 ng/ml,碳酸盐缓冲液的包被效果较好,以4℃过夜+37℃2 h佳,最佳封闭液为2%山羊血清,酶标抗体的工作浓度为0.13μg/ml。建立的标准曲线方程为y=-1.844 4x-0.140 1(R2=0.981 7),检测范围为0~20 ng/ml,最低检测限为0.58 ng/ml。该标准曲线的批内变异系数和批间变异系数分别为2.22%和2.37%。[结论]该研究建立了定量检测奶牛孕酮的间接竞争ELISA方法。

• 出版日期2008
• 单位吉林大学