牛pAcGFP-FADD融合蛋白真核表达载体构建及在CHO-K1细胞中的表达

作者：杨润军; 许尚忠; 张路培; 李俊雅; 高雪

来源：生物工程学报, 2008, (11): 1880-1887.

• FADD
• pAcGFP-Nl
• 重组质粒
• CHO-K1细胞 FADD
• pAcGFP-Nl
• recombinant plasmid
• CHO-K1 cell

FADD是Fas/FasL系统的一个信号连接蛋白,通过传递凋亡信号,介导细胞凋亡。为了揭示FADD在牛卵泡发育过程中的调控作用,采用RT-PCR从牛卵巢组织中扩增FADD基因,将其cDNA终止密码子删除,采用定向克隆技术连接到带有水母绿色荧光蛋白(AcGFP)报告基因的真核表达载体pAcGFP-Nl中,构建融合蛋白重组质粒,经BglⅡ/EcoRⅠ酶切、测序鉴定后,用脂质体介导质粒转染CHO-K1细胞,观察有无荧光的表达及用RT-PCR和Western blotting方法检测基因转录、表达情况。结果表明,成功克隆牛FADD基因,通过PCR方法在FADD阅读框两端引入了BglⅡ和EcoRⅠ克隆位...

• 出版日期2008
• 单位中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 西北农林科技大学