10个肺癌相关基因多重甲基化特异性PCR检测方法的建立

作者：娄加陶; 薛剑; 吴传勇; 葛歆悦; 吴京; 姚见儿

来源：生物医学工程与临床, 2012, (01): 77-83.

DOI：10.13339/j.cnki.sglc.2012.01.024

• 甲基化
• 肺癌
• 多重甲基化特异性PCR methylation
• lung cancer
• multiplex methylation specific PCR

目的建立10个肺癌相关基因的多重甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测方法并运用于临床标本的检测。方法选取19例肺癌患者病灶组织标本,患者中男性16例,女性3例;平均年龄57.3岁。1例肺部良性病变患者组织标本为男性,年龄52岁。通过质粒构建及甲基化转移酶和亚硫酸盐修饰制备10个基因的甲基化和非甲基化标准品。通过选择甲基化特异性引物来识别甲基化模板,挑选10对甲基化特异性引物并平均分成2组,经最佳聚合酶及最佳退火温度的选择,建立多重甲基化特异性PCR体系,并应用于19例肺癌组织的检测,计算10个基因的甲基化率。结果在成功构建10个基因的甲基化和非甲基化标准品的基础上,建立了它们的多重甲基化特异...

• 出版日期2012
• 单位上海交通大学